Estudio in vivo de Polisacaridos Bacterianos en Bovinos

Resumen del proyecto (total 200 palabras)

El objetivo del presente proyecto es estudiar in vivo del uso de polisacaridosbacterianos elaborados por el Laboratorio Puebla SRL. La estrategia de esta prueba con polisacaridos bacterianos es evaluar el comportamiento de 4 variables como la, ganancia diaria de peso (GDP) y algunos componentes sanguíneos como, globulos rojos (GR), globulos blancos (GB) e indice de proteínas totales (Pr). 

 Para este ensayo se utilizaron 40 terneras de destete tradicional, (170 Kg promedio), que previamente de les tomó el peso inicial a cada uno de los animales en estudio, se desparasitaron y vacunaron contra el sindrome respiratorio bovino y complejo clostridial bovino. 

Este Proyecto de investigación, fue desarrollado por la Cátedra de Clínica de Animales Grandes y el Hospital Escuela, perteneciente a la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Nacional de La Pampa y se realizó en la Unidad Didáctica Experimental y Productiva (UDEP).Para este trabajo los animales utilizados son provenientes de producción propiay desde el establecimiento el Bajo Verde, correspondiente a la misma Unidad Académica.En el presente ensayo se realizó un análisis económico y estadístico, mediante un ANAVA simple, diseño completamente aleatorizado, balanceado. – o – Prueba T para muestras independientes. 

Introducción y Antecedentes

Dado los diferentes sistemas existentes en el manejo de las explotaciones ganaderas bovinas se está en condiciones de producir carne a través de sistemas extensivos de cría sobre pastizales naturales que, a su vez, y en conjunto con los sistemas mixtos a pasto, provean el insumo del ternero para el sistema de engorde a pasto con suplementación estratégica y engorde a corral.  Conviviendo así modelos de producción en función a las características variadas de ambientes de nuestra provincia y en concordancia con las exigencias de los mercados y las características propias de las empresas ganadera bovinas.

La producción ganadera de carne bovina, en la provincia de La Pampa, durante los últimos años, ha desarrollado un importante giro positivo en el aspecto genéticos, logrando referenciarse como una de las provincias con mayor oferta de establecimiento dedicados a la mejora de las razas británicas más tradicionales de la Argentina lo cual otorga un preponderante valor agregado no solo a la carne sino también a los vientres que aquí se producen.

Por ser la ganadería en general una actividad demandante de tecnología y procesos, la capacitación de los sectores intervinientes en toda la cadena de producción, es importante la implementación de planes sanitarios oficiales y otras herramientas fundamentales que van asociadas al éxito de la producción.

Objetivos

  • Generar condiciones productivas adecuadas para el crecimiento y engorde ganadería bovina.
  • Aumentar la producción y la oferta de carne a partir de los recursos naturales y tecnológicos que posee la empresa agropecuaria en un marco de sustentabilidad socio-ambiental.
  • Generar capacidad de adaptación para asimilar las transformaciones que requieren los procesos productivos modernos. 

Como objetivo específico en este trabajo se apunta a proyectar una ganadería bovina basada en la sanidad, calidad, para hacer más eficientes los índices productivos en el mercado nacional e internacional, por el camino de la implementación innovación científico-tecnológica, que mejore la producción de carne bovina y de lugar a la integración de la cadena productiva conformada por los sectores productivos, industrial y comercial.

         De esta maneratratamos de apuntar a mejorar los índices  productivos con el aporte exógeno de polisacaridosextraidos de pared de bacterias gram (-), ya que en las mismas se ha demostrado que existen particularidades en cuanto a su mecanismo de acción, como lo son la activación policlonal de linfocitos B. Algunas bacterias gram negativas presentan en su superficie lipopolisacáridos (endotoxinas) capaces de estimular a linfocitos B en forma independiente de su especificidad idiotípica. Estas endotoxinas, cuando están en dosis altas, se unen a la membrana de linfocitos B en una estructura aún no identificada estimulando su activa proliferación sin necesidad de la participación de citoquinas. Los activadores policlonales de células B pertenecen por lo tanto a la categoría de antígenos T independientes. La respuesta policlonal se manifiesta como la secreción de grandes cantidades de IgM e IgG3 sin presentar otra variación de isotipo, maduración de afinidad ni generación de memoria, como ocurre en las respuestas T dependientes. La presencia de IgG3 sugiere la participación de linfocitos T los que serían estimulados por el componente lipídico de los LPS. Estos mismos antígenos en dosis bajas estimulan específicamente a linfocitos B por lo que son considerados antígenos y no mitógenos.

Durante mucho tiempo las investigaciones con LPS no superaron la fase del bioterio debido a la toxicidad de la fracción lipoide A, siendo el Laboratorios Puebla quien ha logrado un compuesto polisacarídico libre de esa fracción, manteniendo además las acciones  inmunológicas descriptas.

Materiales y Métodos

Establecimientos y criterios de selección: El desarrollo de este proyecto se realizó en la Unidad Demostrativa Experimental y Productiva de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Nacional de La Pampa, ubicada en el norestede la Provincia, con una temperatura calurosa que dura 3,6 meses, desde el 22 de noviembre al 10 de marzo, registrándose una media de entre 27 y 30° y un régimen de precipitaciones, en donde la temporada más mojada dura 6 meses, del 23 de septiembre al 15 de abril, arrojando una media de 547 mm

El criterio utilizado para realizar el presente trabajo fue realizar la selección: de 40 animales, todas hembras,razas británicas y sus cruzas. Posteriormente se procedió ala identificación con caravanas a los 40 animales de la prueba. Color rojo a los testigos y de color blanco a los tratados. En el mismo momento se pesaron todos los animales quedando seleccionados con el mismo peso o con diferencias mínimas, donde quedóconfeccionado los 2 grupos a estudiar.

Tratamiento. La prueba duró 170 días, donde al grupo de prueba se les inyectó 10 mldel polisacárido a estudiar formulado como MK471 por el laboratorio Puebla SRL.  En ese momento se los pesó en su totalidad para estimar otra variable, como la ganancia diaria de peso y a las 72 horas se extraía sangre a los 40 animales utilizados, quese enviaban al laboratorioubicado en la Unidad Académicade la Facultad de Ciencias Veterinarias, para evaluar algunos parámetros sanguíneos como proteínas, globulos rojos y globulos blancos. Durante el desarrollo de este trabajo se tomaron un total de 160 muestras de sangre y 5 mediciones de peso.

Los animales que se utilizaron convivieron en pastura de alfalfa durante el período octubre-abril y en el mismo lote subdivido en parcelas de 2 hectáreas.

Determinación de GDP y análisis de sangre: Esta variable se midió en la estación experimental (UDEP), correspondiente a la Facultad de Ciencia Veterinarias de la UNLPam, con balanza que estima pesos individuales a los animales vinculados al proyecto de investigación, el mismo duró aproximadamente 170 días y en total se realizaron en 5 oportunidades, la medición de esta variable.      

La toma de muestra de sangre se realizó 72 horas posteriores a la medición de peso a cada uno de los 40 animales en estudio, para evitar el stress y enmascarar algunos índices hematimétricos, este procedimiento se realizó mediante veno-punción yugular con jeringas de 10 ml de sangre, que se la colocaba en tubos con EDTA, para este procedimiento también se utilizaron agujas 40/12. Cada una de las muestras fueron identificadas individualmente para cada animal en estudioy luego se enviaba al laboratorio de nuestra Unidad Académica y Privados, donde se realizaron la medición de 3 variables sanguíneas como GR, GB, y Pr. En total se tomaron 4 muestras de sangre durante los 170 días que duró la prueba.

El recuento de glóbulos rojos y blancos se realizará en la cámara de Newbauer. Para los eritrocitos se realiza una dilución 1:200 de la muestra de sangre en solución salina al 0.85%, y se procede al recuento con microscopio óptico (40x) en las áreas correspondientes.; el valor obtenido se expresa en millones por milímetro cúbico. 

En el caso de los leucocitos la dilución que se preparara será de 1:20, con una solución de Turk (ácido acético glacial al 3%); el recuento a través del microscopio (10x), se realizará en las areas de la cámara destinadas a tal fin, y el resultado se expresará como leucocitos por milímetro cúbico. 

Para medir la proteinemia se utilizará un refractómetro y el tubo capilar del microhematocrito. Una vez separados los componentes sanguíneos e el capilar, y luego de efectuada la lectura de la masa eritrocitaria, se romperá el capilar por encima de la capa flogística y se descargarán unas gotas de plasma sobre el prisma del refractómetro y se observará el valor de proteínas expresada en g/dl.

Diseño Experimental  y Análisis Estadísticos

Resultados

Al inicio del ensayo, se realizaron mediciones para verificar que las medias y las varianzas de los animales muestreados para conformar los grupos control (C) y tratamiento (T) eran estadísticamente iguales en las cuatro variables de interés (peso inicial, glóbulos rojos, glóbulos blancos y proteínas). Los análisis estadísticos mostraron la existencia de homogeneidad de varianzas para las cuatro variables (pHomVar>0,05) y la no existencia de diferencias entre las medias (p-valor>0,05). Ambos grupos al inicio del experimento no mostraron diferencias estadísticas.

Si bien se realizaron mediciones consecutivas los días 21, 73, 107 y 170 postratamiento, en el presente trabajo se analiza el efecto de la aplicación del inmunoestimulante MK471 en la última medición. Los resultados a los 170 días de iniciado el tratamiento se muestra en la figura 1. 

Figura 1: Valores medios, mínimos, máximos y errores estándar de las variables en estudio a los 170 días

Grupo Control    
VariablesUnidadMedia E.E. MínMáx
GR      x 106/mm36,520,244,808,10
GB      x 103/mm38,000,156,709,10
Proteínag/100 mm36,690,135,707,80
Peso    kg346,004,19310,00383,00
GrupoTratamiento    
VariablesUnidadMedia E.E. MínMáx
GR      x 106/mm37,520,126,808,40
GB      x 103/mm38,020,136,909,10
Proteínag/100 mm37,110,066,707,50
Peso    kg366,306,35311,00401,00

La figura 2 muestra en forma gráfica el comportamiento de la variable peso en las sucesivas mediciones realizadas en los grupos control y tratamiento, observándose una clara diferenciación a partir de la medición realizada el día 73. 

Figura 2: Representación gráfica de la evolución del peso

El análisis estadístico de las variables medidas a los 170 días de comenzado el ensayo, muestra diferencias altamente significativas entre el grupo de tratados y el grupo control en ganancia de peso, glóbulos rojos y proteína; no así en glóbulos blancos (figura 3). En la misma también se presentan resultados de la variable ganancia diaria de peso (GDP), calculada como la diferencia de peso entre mediciones divida por los días transcurridos. En este caso las GDP corresponden a los últimos 63 días del ensayo. 

Figura 3: Resultados del análisis de la varianza en las mediciones realizadas a los 170 días

Variablep-valorDiferenciasestadísticas
Ganancia de Peso<0,0001**
GlóbulosRojos0,0005**
GlóbulosBlancos0,94ns
Proteína0,0067**
** Diferencias altamente significativas. ns Diferencias no significativas

Las GDP en cada momento de medición mostraron diferencias altamente significativas p < 0,001 (figura 4). 

Figura 4: Valores medios de las ganancias diarias de peso (kg/día)

Días2173107170
Fecha26/11/1917/01/2020/02/2023/04/20
Control (kg/día)0,7230,2541,0090,380
Tratamiento (kg/día)0,9930,3381,1720,456
Error Estándar (kg/día)0,0650,0090,0130,010
Diferenciasestadísticas********

** Diferenciasaltamentesignificativas

La GDP del período de duración del ensayo (170 días) para el grupo control fue de 0,505 kg/día y la GDP del grupo tratado fue de 0,624 kg/día. Las diferencias estadísticas entre ambos grupos fueron de p < 0,0001. 

Análisis de costos

Análisis Marginal

Costo marginal es el costo adicional del tratamiento (la dosis + el costo del veterinario), en este caso es 700 pesos el día.

El ingreso marginal es el ingreso adicional que se obtiene con el tratamiento (20,23 kg por el precio neto de venta de esos kilos)

700 pesos el día de trabajo x 4 días = 2.800 pesos / 20 animales = 140 $/animal

Conclusiones

Análisis Marginal

Costo marginal                                                                   Ingreso marginal

Costo de la dosis + veterinario                           ganancia adicional de peso x $/kg

160 $/animal + 140 $/animal                                       20,23 kg/animal x 107 $/kg

       300 $/animal                                                                         2.164 $/animal

Como el ingreso marginal es mayor que el costo marginal es conveniente productiva y económicamente rentable realizar el tratamiento

Discusión

Media GDP Control 505 gramos

Media GDP Tratamiento 624 gramos

Diferencia: 119 gramos/día/animal

23.56 % más de GDP

170 días x 0.119 Kg/día = 20.23 Kg/animal (vaquillona)

20.23 Kg/animal x $ 115,00/Kg= $ 2326.45

Valor de Frasco: $1.000/25 dosis= $40/dosis

4 dosis= $ 160.00

Ganancia neta: $ 2326,45/vaquillona

Conclusiones

Como conclusión, se puede observar al finalizar el ensayo que el tratamientocon el producto formulado a base de polisacaridos bacterianos( nombre comercialMK471) elaborados por el Laboratorio Puebla SRL ha tenido un impacto positivo en lo productivo por sobre los animales que no recibieron el tratamiento; esto se refleja en un 23,56 % de mayor ganancia diaria promedio. Asimismo, el análisis económico marginal del tratamiento promueve la aplicación del mismo, ya que el costo marginal (costo adicional) es de 300 pesos por animal (dosis + aplicación) y el ingreso marginal (ingreso adicional generado) es de 2.164 pesos por animal.

AnimalTratamientoPeso.inicial  Peso.final      GDP
1C2833690,506
2C2853600,441
3C2603620,600
4C2623480,506
5C2843600,447
6C2503460,565
7C2733660,547
8C2433380,559
9C2453270,482
10C2423180,447
11C2903830,547
12C2723500,459
13C2423380,565
14C2383100,424
15C2443330,524
16C2493200,418
17C2453360,535
18C2613460,500
19C2653590,553
20C2693510,482
21T2813860,618
22T2833880,618
23T2543610,629
24T2913970,624
25T2733930,706
26T2683740,624
27T2693730,612
28T2873940,629
29T2663740,635
30T2103110,594
31T2483560,635
32T2223200,576
33T2823890,629
34T2303320,600
35T2854010,682
36T2293290,588
37T2413430,600
38T2433460,606
39T2533580,618
40T2904010,653

Medidas resumen

Tratamiento   Variable  n Media D.E. Mín Máx

C          Peso.inicial 20 260.10 16.86 238.00 290.00

C          Peso.final 20 346.00 18.74 310.00 383.00

C          GDP         20   0.51 0.05   0.42   0.60

T          Peso.inicial 20 260.25 24.82 210.00 291.00

T          Peso.final 20 366.30 28.37 311.00 401.00

T          GDP         20   0.62 0.03   0.58   0.71

Medidas resumen

medicion Tratamiento Variable n Media D.E. Mín Máx

1       C          peso    20 260.10 16.86 238.00 290.00

1       C          GR      20   5.79 0.44   4.90   6.50

1       C          GB      20   7.79 0.72   6.60   9.20

1       C          pr 20   6.81 0.45   5.90   7.50

1       T          peso    20 260.25 24.82 210.00 291.00

1       T          GR      20   6.01 0.68   4.80   7.20

1       T          GB      20   7.56 0.84   5.90   8.90

1       T          pr 20   6.54 0.66   5.50   7.50

21      C          peso    20 274.55 17.17 245.00 308.00

21      C          GR      20   5.79 0.28   5.30   6.20

21      C          GB      20   7.44 0.87   5.90   9.00

21      C          pr 20   6.69 0.66   5.50   7.80

21      T          peso    20 280.10 25.62 228.00 311.00

21      T          GR      20   6.67 0.35   5.90   7.30

21      T          GB      20   8.34 0.39   7.70   9.00

21      T          pr 20   6.75 0.57   5.70   7.50

73      C          peso    20 287.75 17.34 258.00 321.00

73      C          GR      20   5.92 0.46   4.90   6.50

73      C          GB      20   7.76 0.57   6.80   8.60

73      C          pr 20   6.72 0.49   5.90   7.50

73      T          peso    20 297.70 26.16 245.00 330.00

73      T          GR      20   7.28 0.42   6.30   7.80

73      T          GB      20   8.19 0.32   7.60   8.90

73      T          pr 20   6.99 0.36   6.30   7.40

107     C          peso    20 322.05 18.94 288.00 358.00

107     C          GR      20   6.30 0.42   5.50   7.20

107     C          GB      20   8.00 0.48   6.90   8.80

107     C          pr 20   6.62 0.62   5.60   7.50

107     T          peso    20 337.55 27.29 283.00 370.00

107     T          GR      20   7.54 0.31   6.80   7.90

107     T          GB      20   8.49 0.32   7.80   8.90

107     T          pr 20   7.16 0.35   6.10   7.70

170     C          peso    20 346.00 18.74 310.00 383.00

170     C          GR      20   6.52 1.07   4.80   8.10

170     C          GB      20   8.00 0.67   6.70   9.10

170     C          pr 20   6.69 0.60   5.70   7.80

170     T          peso    20 366.30 28.37 311.00 401.00

170     T          GR      20   7.52 0.52   6.80   8.40

170     T          GB      20   8.02 0.58   6.90   9.10

170     T          pr 20   7.11 0.27   6.70   7.50

RELACION COSTO BENEFICIO TRABAJO UNIVERSIDAD GRAL PICO. CON MK471

LOTE TESTIGO:

Peso inicial Promedio =     5202 / 20 =  260.10 Kg

Peso final Promedio =     6920 / 20 = 346,00 Kg

Ganancia Promedio por animal =         346,00 – 260,10 =   85,9 Kg.

Ganancia diaria promedio por animal =      85,9 / 170 días = 506 g.

LOTE TRATADO CON MK471

Peso inicial promedio =       5205 /20 = 260,25 kg.

Peso final promedio =       7326/20 = 366,30 Kg.

Ganancia promedio por animal =                    366,30 – 260,25 = 106,05 Kg.

Ganancia diaria promedio por animal =         106,05 / 170 días = 623,80 g

Arroja una diferencia de ganancia de peso diario del  23,28 %

COSTO DEL TRATAMIENTO:( considerando el frasco de MK471 a $ 1000,00 )

 4 Dosis de 10 cc. X 20 animales X $ 40,00 =  $ 3200,00

BENEFICIO DEL TRATAMIENTO:

Ganancia de peso total lote testigo  6920-5202 = 1718 kg.

Ganancia  de peso total lote tratado Mk471 . 7326 – 5205 = 2121 Kg.

Diferencia en kg. Entre lote tratado y lote testigo . 2121 -1718 = 403 Kg.

Si consideramos el precio al que se vendieron  estos animales en $ 115 x Kg. 

El beneficio es = 403 x 115 =  $ 46.345,00

El beneficio neto es = 46.345 – 3200,00 = $ 43.145,00

LUEGO LA RELACION COSTO BENEFICIO ES = 13.48 a 1

Expresado en % es MAYOR AL 1.300 %

INVIERTE $ 1,00 y GANA $ 13.48 netos.